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全能核酸酶 ELISA 檢測試劑盒

產(chǎn)品簡介

全能核酸酶 ELISA 檢測試劑盒用于檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中核酸酶的殘留含量,柏萊源生物代理Hillgene公司產(chǎn)品,請咨詢我們貨期準(zhǔn)確產(chǎn)品信息及報(bào)價(jià)!

產(chǎn)品型號(hào):HG-BE001
更新時(shí)間:2025-03-27
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    全能核酸酶 ELISA  檢測試劑盒 說明書

貨號(hào): HG-BE001

全能核酸酶 ELISA 檢測試劑盒


產(chǎn)品簡介:

全能核酸酶 ELISA  檢測試劑盒用于檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中核酸酶的殘留含量。 

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)測定樣品中全能核酸酶(以下簡稱核酸酶)的微量殘留。用捕獲抗體包被 96 孔酶標(biāo)板,制成固相抗體,隨后加入標(biāo)準(zhǔn)品和檢測樣品,再加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的標(biāo)記抗體,形成一個(gè)固相抗體-核酸酶-標(biāo)記抗體的三明治結(jié)合物,反應(yīng)結(jié)束后洗滌,然后加入底物進(jìn)行顯色反應(yīng),底在HRP的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在終止液的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測樣品中核酸酶的含量。

規(guī)格:

96 T

產(chǎn)品組成:

備注:試劑保存溫度為2~8℃,顯色液A和顯色液B應(yīng)避光保存。

組分規(guī)格配制
Nucleases Coated Plate ( 包被酶標(biāo)板 )8×12條-20℃
Nucleases Standard ( 標(biāo)準(zhǔn)品 ) 100μL×1管(0.5μg/mL)按建議稀釋方式操作
Anti-Benzonase (酶標(biāo)抗體) 15mL×1瓶即用型
Sample Diluent Buffer (樣品稀釋液)30mL×1瓶即用型
20×Wash Buffer (20×洗液) 30mL×1瓶按建議稀釋方式操作
Color Reagent A (顯色液A) 8mL×1 瓶即用型
Color Reagent B (顯色液B)8mL×1 瓶即用型
封板膜5張即用型
說明1份/


產(chǎn)品儲(chǔ)存條件與有限期:

未開封的試劑盒, 2-8℃條件下有效期為12個(gè)月。

本試驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材:

1. 酶標(biāo)儀、酶標(biāo)板恒溫振蕩器或恒溫培養(yǎng)箱、洗板機(jī)。 

2. 高精度移液器及一次性吸頭(0.5-10µL、10-100µL、30-300µL、100-1000µL)。 

3. 去離子水、吸水紙、 EP管。

試劑準(zhǔn)備:

1.1×洗液:取洗液(20×)1份,加19份去離子水配制成工作濃度洗液(1×)。洗液(20×)中如果有結(jié)晶形成,應(yīng)置于室溫或37℃水浴輕輕搖晃,待結(jié)晶完i全溶解后再進(jìn)行稀釋。未用完的洗液(20×)應(yīng)置于2-8℃儲(chǔ)存。 

2. 標(biāo)準(zhǔn)品的配制:用樣品稀釋液將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至5ng/mL,然后用2.5倍倍比稀釋的方法配制標(biāo)準(zhǔn)品。 

3. 底物液的配制:使用前i十分鐘將顯色液A、顯色液B等體積混合,避光。確保底物液不被污染,如混合后的底物液已經(jīng)變藍(lán),請勿使用。

試劑準(zhǔn)備:

1. 將試劑盒各組分恢復(fù)室溫(20-25℃)30min,從已平衡至室溫的鋁箔袋中取出試驗(yàn)所需板條,用記號(hào)筆標(biāo)記板條順序,剩余板條用封板膜封板后重新放回鋁箔袋中,封好,置于2-8℃保存。

詳見樣品前處理試劑盒(貨號(hào)為HG-CL100)操作說明書。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品的配制:用樣品稀釋液將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至5ng/mL,然后用2.5倍倍比稀釋的方法配制標(biāo)準(zhǔn)品,如下圖:

全能核酸酶 ELISA 檢測試劑盒

3. 樣品溫育:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、空白孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔按順序加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品100µL,空白孔加入樣品稀釋液100µL,樣本孔中加入待測樣本100µL,用封板膜封板,然后置于37℃溫育1h。

4. 洗板:棄去孔中液體,用1×洗液洗板3次(250µL/孔),拍干樣品孔中的殘留液體。(每次加入洗液后,如采用手洗板,加洗液后可靜置1min并輕微震蕩;如采用洗板機(jī)洗板,加洗液后可輕微震蕩5s。) 

5. 酶標(biāo)抗體溫育:每孔加入100µL酶標(biāo)抗體,用封板膜封板,然后置于37℃溫育1h。 

6. 洗板:同步驟4。 

7. 顯色:將預(yù)先配置好的底物液加入酶標(biāo)板中,混勻(100µL/孔),用封板膜封板, 37℃避光溫育15min。 

8. 終止:加入終止液, 100µL/孔。 

9. 讀數(shù):在酶標(biāo)儀中測定雙波長450/630nm處的OD值,測定應(yīng)在終止后20min內(nèi)完成。

結(jié)果處理:

以核酸酶標(biāo)準(zhǔn)品的OD值(OD450nm-OD630nm)為因變量Y,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為自變量X做曲線。推薦使用四參數(shù)Logisitic數(shù)學(xué)模型擬合方程: Y=((A-D)/(1+(x/C)^B))+D,以樣品OD值(OD450nm-OD630nm)代入公式計(jì)算樣品中核酸酶的含量)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線:

全能核酸酶 ELISA 檢測試劑盒

實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果:


標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/mL)O D 值 ( 1 )O D 值 ( 2 )平均值
1.925 1.774 1.849 
0.917 0.865 0.891 
0.8 0.447 0.441 0.444 
0.32 0.228 0.209 0.218 
0.128 0.146 0.137 0.141 
0.0512 0.114 0.107 0.110 

 


 

注意事項(xiàng):

1. 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷。

2. 試劑盒必須在有效期內(nèi)使用。 

3. 試劑盒內(nèi)所有組分都必須恢復(fù)至室溫(18-25℃)后方可使用。 

4. 試劑盒各組分使用前充分混勻,板條洗滌后拍干時(shí),注意防止板條脫落。 

5. 只有嚴(yán)格遵守說明書的操作方法,全部使用本試劑盒配套的試劑才能保證優(yōu)良檢測效果。 

6. 注意在不同樣本和步驟間及時(shí)更換加樣槽和吸頭,避免交叉污染。 

7. 最終的試驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)。 

8. 本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。

注意事項(xiàng):


問題描述可能原因相應(yīng)對策
標(biāo)準(zhǔn)曲線梯度差吸液或加液不準(zhǔn)檢查移液器及吸頭
酶標(biāo)板洗滌不完i全保證洗板次數(shù)及每孔的洗液用量
顯色很弱或無色溫育時(shí)間太短保證足夠的溫育時(shí)間
實(shí)驗(yàn)溫度不正確使用推薦的溫育溫度
試劑體積不夠或漏加檢查吸液及加液過程,保證所有試劑按順序足量添加
OD值讀數(shù)低酶標(biāo)儀設(shè)置不正確在酶標(biāo)儀上檢查波長和濾光片裝置
讀數(shù)前應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀進(jìn)行預(yù)熱
變異系數(shù)大加液不正確檢查加液情況
酶標(biāo)板底部有污染檢查酶標(biāo)板底部是否有殘留的液體和手印
板孔內(nèi)有異物或氣泡加樣前確認(rèn)板孔內(nèi)無異物,加樣后確認(rèn)無氣泡
背景值高酶標(biāo)板洗滌不完i全按說明書推薦的方法進(jìn)行洗板
如果用自動(dòng)洗板機(jī),請檢查所有的加液口和排廢液口是否有堵塞
如果是手洗板,可適當(dāng)增加洗板次數(shù)
洗液有污染配制新鮮洗液
靈敏度低試劑盒保存不當(dāng)按說明書要求保存相關(guān)試劑

















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柏萊源(天津)生物科技有限公司的優(yōu)勢:

現(xiàn)貨供應(yīng):公司庫存充足,可快速發(fā)貨,減少用戶等待時(shí)間。

效期保障:嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量,確保試劑效期新鮮,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

專業(yè)技術(shù)支持:提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)指導(dǎo),幫助用戶優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,提高實(shí)驗(yàn)成功率。

定制化服務(wù):根據(jù)用戶需求,提供個(gè)性化的產(chǎn)品和服務(wù)解決方案。

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